DNA纯化磁珠

产品货号：

JN3240

中文名称：

DNA纯化磁珠

英文名称：

BalbNGS DNA Clean Beads

产品规格：

5mL|60mL

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本磁珠基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理，可广泛应用于NGS (Next Generation Sequencing)文库构建中DNA纯化和特定长度DNA片段的分选。BalbNGS DNA Clean Beads适用于不同品牌的DNA、RNA建库试剂盒和文献报道的建库流程，文库的产量、大小分布与AMPure XP Beads高度一致。

适用范围

高通量测序文库构建中DNA片段的分选及纯化，PCR反应体系、酶切及连接反应体系中DNA的纯化，游离核酸筛选，核酸提取过程中小片段DNA的去除等。

产品特点

高效：DNA片段纯化得率高；
简便：无需切胶，自由选择所分选DNA片段的长度；
兼容：兼容手工操作或自动化工作站的高通量操作。

组分	5mL	60mL
BalbNGS DNA Clean Beads	5mL	60mL
说明书	1份

保存：2～8℃

试剂盒中提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度上保证文库质量的稳定性和重复性。

操作流程

DNA纯化操作步骤：
- 准备工作：将磁珠由冰箱中取出，室温平衡至少30min。配制80%乙醇；
- 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀，吸取一定体积（参考表1）磁珠液加入DNA样品中，使用移液器轻轻吸打10次充分混匀；
- 室温孵育10min，使DNA结合到磁珠上；
- 将样品短暂离心并置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约5min），小心移除上清；
- 保持样品始终置于磁力架中，加入200μL新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育30sec后，小心移除上清；
- 重复步骤5；
- 保持样品始终置于磁力架中，开盖干燥5min～10min；
- 将样品从磁力架中取出，加入适量无核酸酶水，使用移液器轻轻吹打至充分混匀，室温静置5min；
- 在磁力架上静置5min待溶液澄清后，小心吸取上清至一个新的无核酸酶管中。
DNA分选操作步骤：
- 准备工作：将磁珠由冰箱中取出，室温平衡约30min。
  配制80%乙醇；
- 请涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证混匀，吸取适量体积磁珠液（参考表2，第一轮分选）加入到纯化后的DNA处理样品中，使用移液器轻轻吸打10次充分混匀；
- 室温孵育10min，使DNA结合到磁珠上；
- 将样品置于磁力架上，待溶液澄清后（约5min），小心吸取上清至一个新的无核酸酶管中，丢弃磁珠；
- 加入适量磁珠液（参考表2，第二轮分选），使用移液器吸打10次充分混匀；
- 室温孵育10min，使DNA结合到磁珠上；
- 将样品置于磁力架上，待溶液澄清后(约5min)，小心移除上清；
- 保持样品始终处于磁力架上，加入200μL新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育30 s，小心移除上清；
- 重复步骤8一次；
- 保持样品始终处于磁力架上，室温下开盖干燥磁珠约5～10min；
- 将样品从磁力架上取出，加入适量无核酸酶水，涡旋振荡或使用移液器吹打充分混匀，室温静置2min；
- 在磁力架上静置5min，待溶液澄清后，小心吸取上清至一个新的无核酸酶管中。

表1.DNA纯化条件参考

纯化后DNA片段大小	纯化磁珠用量(磁珠体积用量：样品体积)
≥1Kb	0.5×
≥400bp	1.0×
≥300bp	1.2×
≥200bp	1.5×
≥100bp	2.2～3.0×

表2.DNA片段分选参考条件

片段平均长度	150～200bp	200～250bp	250～300bp	300～350bp	350～400bp
第一轮用量	1.0×	0.9×	0.8×	0.7×	0.7×
第二轮用量	0.3×	0.2×	0.2×	0.2×	0.1×

片段平均长度	400～450bp	450～500bp	500～550bp	550～600bp	600～650bp
第一轮用量	0.6×	0.6×	0.55×	0.5×	0.45×
第二轮用量	0.15×	0.1×	0.1×	0.15×	0.15×

举例：“0.7×”代表磁珠与PCR产物的体积比，若PCR产物体积为50μL，则第一轮磁珠用量0.7×50μL=35μL，第二轮磁珠用量为0.2×50μL=10μL，具体PCR产物体积请以使用的建库试剂盒为准。
注意：由于PCR过程中水分蒸发导致PCR产物体积小于原有体积，请务必用无核酸酶水补齐，否则会导致分选长度和预期不一致。
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